（本试剂仅用于科研、实验、技术支持，不直接用于临床诊断） 【简介】 本试剂用于体外定量测定人血清或血浆中总蛋白的浓度。 蛋白质是血清的主要成分,分白蛋白和球蛋白两类,在机体中具有重要的生理功能。血清总蛋白增加常见于严重腹泻、呕吐、肾上腺皮质功能减退、营养不良和消耗增加等，肝脏疾病亦可导致总蛋白水平降低。 【测定方法】 双缩脲比色法 【测定原理】 在碱性条件下，蛋白质多肽链中的肽键与铜离子作用形成紫红色化合物，通过比色测定紫红色化合物的吸光度对总蛋白进行定量。 【试剂盒组成】 | 规 格 | 组 份 | 浓 度 | 试剂 | 液体单一 | 硫酸铜、 酒石酸钾钠、碘化钾 | 适量 | TP校准品 | 液体 | 蛋白质、稳定剂 | 80g/L |
【样本要求】 不溶血血清或肝素抗凝血浆，样本中总蛋白在室温（18-25℃）条件下可稳定1周，在冷藏（2-8℃）条件可稳定1个月，冷冻（-20℃）条件则可稳定更长时间。 【测定步骤】 1、本试剂为液体单一试剂，可直接使用。 2、测定参数：波长：546nm；光径：1.0cm；温度：37℃。 3、测定方法： 加入物 | 空白管 | 校准管 | 测定管 | 单一试剂 | 300 | 300 | 300 | 蒸馏水(uL) | 6 | - | - | 校准液(uL) | - | 6 | - | 样本(uL) | - | - | 6 | 混匀，置37℃孵育10分钟，读取各管吸光度A |
4、上机参数： 温 度 | 37℃ | 血清+试剂反应时间 | 600秒 | 样本量 | 6uL | 主 波 长 | 546nm | 试剂 | 300uL | 副 波 长 | 660nm |
5、计算： TP含量 （g/L） = [（A标本-A空白）/ （A校准-A空白）] × 校准值 【性能指标】 1、 空白吸光度 ≤ 0.5； 2、 线性范围 （0-100）g/L； 3、 批内/分析内精密度 CV≤4％；批间相对极差 ≤6％； 4、 准确性 相对偏差不超过±10％。 5、 抗干扰性 血清胆红素<250umol/L、TG<12mmol/L、血红蛋白< 5.0g/L，对测定结果无显著影响。 6、 方法对照 本试剂盒检测方法与日本一化的方法进行相关性比较试验，结果如下：Y=1.033X-0.15，r=0.99，n=30，Y为本法试剂，X为日本一化试剂。 【注意事项】 1、试剂变混浊或空白吸光度值＞0.5时，将不能使用，应弃去； 2、建议各实验室建立自己的正常值范围； 3、试剂与样本量可根据需要按比例调节； 4、请勿用嘴直接吸取试剂，避免接触皮肤、眼睛及粘膜，一旦接触，应即用水冲洗污染部位； 5、使用配套的校准品校准，校准周期为30天，更换试剂批号时需要重新校准。建议使用正常值和病理值生化质控血清进行室内质控，测定的控制值应在确定的限制范围内，若控制值失控，实验室应采取适当的纠正措施。 【参考范围】 儿童 1天～4周 45～68 g/L 2～12月 45～73 g/L 12 月以上 58～80 g/L 成人 60 ～ 85g/L； 建议各地建立本地区的参考值范围。 【储存条件与有效期】 未开封的试剂在2-8℃避光条件下可稳定12个月，置37℃水浴至少可稳定7天。 试剂开封后，在2-8℃可稳定4周。 【参考文献】 1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed.Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p. 644-7. 2. Johnson Am, Rohlfs EM, Silverman LM. Proteins. In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W.B Saunders Company; 1999. p. 477-540.
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