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创烨生物:总胆固醇测定试剂使用说明、性能指标  
发布者:idrfz.chen   
 

 (本试剂仅用于科研、实验、技术支持,不直接用于临床诊断)

【简介】

本试剂盒用于测定血清中总胆固醇含量。

TC 增高:常见于动脉粥样硬化、原发性高脂血症 ( 如家族性高胆固醇血症、家族性 ApoB 缺陷症、多源性高胆固醇血症、混合性高脂蛋白血症等 ) 、糖尿病、肾病综合征、总胆管阻塞、甲状腺功能减退、肥大性骨关节炎、老年性白内障和牛皮癣。

TC 降低:常见于低脂蛋白血症、贫血、败血症、甲状腺功能亢进、肝脏疾病、严重感染、营养不良、肠道吸收不良和药物治疗过程中的溶血性黄疸及慢性消耗性疾病,如癌症晚期等。

【测定方法】

氧化酶法

【测定原理】

血清中总胆固醇被胆固醇酯酶水解成游离胆固醇和脂肪酸,游离胆固醇被胆固醇氧化酶氧化生成△4-胆甾烯酮和过氧化氢,后者再参与Trinder反应生成红色化合物,引起546nm处吸光度的上升,吸光度的变化与总胆固醇的含量成正比。

【试剂盒组成】

 

    

    

    

试剂

液体双试剂

试剂Ⅰ:试剂Ⅱ=41

4-氨基安替比林、酚衍生物、工具酶等

适量

TC校准品

液体

胆固醇、稳定剂等

见标签

【样本要求】

不溶血血清或肝素抗凝血浆。样本中的甘油三酯在2-8℃可稳定7天。

【测定步骤】

1.本试剂为液体双试剂,可直接使用。

2.测定参数:波长:546nm;光径:10mm;温度:37

3.测定方法:

加入物

空白管

校准管

测定管

试剂Ⅰ

300

300

300

蒸馏水(uL)

3

-

-

标准液(uL)

-

3

-

样本(uL)

-

-

3

混匀,置37孵育5分钟,读取各管吸光度A1

试剂Ⅱ(uL)

75

75

75

混匀,置37保温5分钟,读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1

4.上机参数:

  

37

血清+R1反应时间

300

样本量

3uL

  

546nm

试剂Ⅰ

300uL

  

660nm

试剂Ⅱ

75uL

血清+R1+R2反应时间

300

 

5.计算:

TC含量 mmol/L =  [(ΔA标本-ΔA空白)(ΔA校准-ΔA空白)]  ×校准品值

【性能指标】

1 空白吸光度 0.050

2 线性范围0-20.0mmol/L

3 批内/分析内精密度  CV5%;批间相对极差 7%;

4 准确性  相对偏差不超过±10%。

5 抗干扰性  血清胆红素<140μmol/L、血红蛋白<5 g/LTG<5.5mmol/L时,对测定无显著影响。

6 方法对照  用本测定试剂和日本第一化学株式会社TC测定试剂测定100例血清TC含量,结果显示相关系数>0.980

【注意事项】

1、试剂变混浊或空白吸光度值>0.05时,将不能使用,应弃去;

2、建议各实验室建立自己的正常值范围;

3、试剂与样本量可根据需要按比例调节;

4、请勿用嘴直接吸取试剂,避免接触皮肤、眼睛及粘膜,一旦接触,应即用水冲洗污染部位;

5、使用配套的校准品校准,校准周期为30天,更换试剂批号时需要重新校准。建议使用正常值和病理值生化质控血清进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施。

6当标本浓度超过检测范围时,应用生理盐水稀释标本后再进行检测,标本值为测定值乘以稀释倍数。

7可以将R1R2混成单试剂工作液。

【参考范围

3.35-6.45mmol/L

建议各实验室建立自己的正常参考值范围。

【储存条件与有效期】

未开封的试剂在2-8℃避光条件下可稳定12个月,置37℃水浴至少可稳定7天。

试剂开封后,存放在分析仪试剂仓中(2-8)的试剂在30天内性质稳定。

【参考文献】

1UwajimaT,etal.AgrBiolChem.1974,38(6):1149.

2UwajimaT,etal.AgrBiolChem.1976,40(10):197.

3UwajimaT,etal.AgrBiolChem.1978,42(7):1453.

4Richmond,W.Clinchem.19(1973).1350.


 


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