（本试剂仅用于科研、实验、技术支持，不直接用于临床诊断） 【简介】 本试剂盒用于测定血清中总胆固醇含量。 TC 增高：常见于动脉粥样硬化、原发性高脂血症 ( 如家族性高胆固醇血症、家族性 ApoB 缺陷症、多源性高胆固醇血症、混合性高脂蛋白血症等 ) 、糖尿病、肾病综合征、总胆管阻塞、甲状腺功能减退、肥大性骨关节炎、老年性白内障和牛皮癣。 TC 降低：常见于低脂蛋白血症、贫血、败血症、甲状腺功能亢进、肝脏疾病、严重感染、营养不良、肠道吸收不良和药物治疗过程中的溶血性黄疸及慢性消耗性疾病，如癌症晚期等。 【测定方法】 氧化酶法 【测定原理】 血清中总胆固醇被胆固醇酯酶水解成游离胆固醇和脂肪酸，游离胆固醇被胆固醇氧化酶氧化生成△4-胆甾烯酮和过氧化氢，后者再参与Trinder反应生成红色化合物，引起546nm处吸光度的上升，吸光度的变化与总胆固醇的含量成正比。 【试剂盒组成】 | 规 格 | 组 份 | 浓 度 | 试剂 | 液体双试剂 试剂Ⅰ：试剂Ⅱ=4：1 | 4-氨基安替比林、酚衍生物、工具酶等 | 适量 | TC校准品 | 液体 | 胆固醇、稳定剂等 | 见标签 |
【样本要求】 不溶血血清或肝素抗凝血浆。样本中的甘油三酯在2-8℃可稳定7天。 【测定步骤】 1.本试剂为液体双试剂，可直接使用。 2.测定参数：波长：546nm；光径：10mm；温度：37℃。 3.测定方法： 加入物 | 空白管 | 校准管 | 测定管 | 试剂Ⅰ | 300 | 300 | 300 | 蒸馏水(uL) | 3 | - | - | 标准液(uL) | - | 3 | - | 样本(uL) | - | - | 3 | 混匀，置37℃孵育5分钟，读取各管吸光度A1 | 试剂Ⅱ(uL) | 75 | 75 | 75 | 混匀，置37℃保温5分钟，读取各管吸光度A2，计算ΔA=A2-A1 |
4.上机参数： 温 度 | 37℃ | 血清+R1反应时间 | 300秒 | 样本量 | 3uL | 主 波 长 | 546nm | 试剂Ⅰ | 300uL | 副 波 长 | 660nm | 试剂Ⅱ | 75uL | 血清+R1+R2反应时间 | 300秒 |
5.计算： TC含量 （mmol/L） = [（ΔA标本-ΔA空白）/ （ΔA校准-ΔA空白）] ×校准品值 【性能指标】 1、 空白吸光度 ≤0.050； 2、 线性范围0-20.0mmol/L； 3、 批内/分析内精密度 CV≤5％；批间相对极差 ≤7％； 4、 准确性 相对偏差不超过±10％。 5、 抗干扰性 血清胆红素<140μmol/L、血红蛋白<5 g/L、TG<5.5mmol/L时，对测定无显著影响。 6、 方法对照 用本测定试剂和日本第一化学株式会社TC测定试剂测定100例血清TC含量，结果显示相关系数>0.980。 【注意事项】 1、试剂变混浊或空白吸光度值＞0.05时，将不能使用，应弃去； 2、建议各实验室建立自己的正常值范围； 3、试剂与样本量可根据需要按比例调节； 4、请勿用嘴直接吸取试剂，避免接触皮肤、眼睛及粘膜，一旦接触，应即用水冲洗污染部位； 5、使用配套的校准品校准，校准周期为30天，更换试剂批号时需要重新校准。建议使用正常值和病理值生化质控血清进行室内质控，测定的控制值应在确定的限制范围内，若控制值失控，实验室应采取适当的纠正措施。 6、当标本浓度超过检测范围时，应用生理盐水稀释标本后再进行检测，标本值为测定值乘以稀释倍数。 7、可以将R1与R2混成单试剂工作液。 【参考范围】 3.35-6.45mmol/L； 建议各实验室建立自己的正常参考值范围。 【储存条件与有效期】 未开封的试剂在2-8℃避光条件下可稳定12个月，置37℃水浴至少可稳定7天。 试剂开封后，存放在分析仪试剂仓中(2-8℃)的试剂在30天内性质稳定。 【参考文献】 1、UwajimaT,etal.AgrBiolChem.1974,38(6):1149. 2、UwajimaT,etal.AgrBiolChem.1976,40(10):197. 3、UwajimaT,etal.AgrBiolChem.1978,42(7):1453. 4、Richmond,W.Clinchem.19(1973).1350.
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