（本试剂仅用于科研、实验、技术支持，不直接用于临床诊断） 【简介】 用于全自动法测定血清果糖胺含量。 果糖胺是血浆中的蛋白质在葡萄糖非酶糖化过程中形成的一种物质，反映1-3周内的血糖水平，是评价糖尿病控制情况的一个良好指标。 【测定方法】 改良NBT比色法 【测定原理】 血清果糖胺在碱性条件下与硝基四氮唑蓝生成紫红色化合物，其颜色深浅与糖化血清蛋白含量成正比，比较后可求得果糖胺含量。 【试剂盒组成】 | 规 格 | 组 份 | 浓 度 | 试剂 | 液体双试剂 试剂I: 试剂II=3:1 | 碳酸钠缓冲液、硝基四氮唑蓝 | 适量 | GSP校准品 | 冻干1ml | 果糖胺、稳定剂 | 见标签 | GSP质控品 | 冻干1ml | 果糖胺、稳定剂 | 见标签 |
【样本要求】 血清或血浆标本均应不溶血。建议采用肝素抗凝血浆样本。样本采集后，应尽快分离血清或血浆。样本置于2~8℃可稳定14天，室温可稳定3天。 【测定步骤】 1.本试剂为液体双试剂，可直接使用。 2.测定参数：波长：546nm；光径：10mm；温度：37℃。 3.测定方法： 加入物 | 测定管（U） | 标准管（S） | 空白管（B） | R1 （μl） | 225 | 225 | 225 | 标本 （μl） | 15 | - | - | 标准液（μl） | - | 15 | - | 蒸馏水（μl） | - | - | 15 | 混匀，置37℃孵育3-5分钟 | R2（μl） | 75 | 75 | 75 | 混匀，置37℃延滞4分钟，读取各管吸光度A1，反应1min，读取各管吸光度A2，计算ΔA=A2-A1 |
4.上机参数： 程序： | 速率法 | | | | | 主波长： | 546nm | 血清+R1孵育时间： | 3-5min | 标本 | 15μl | 辅助波长： | 660nm | 血清+R1+R2延滞时间： | 4min | R1 | 225μl | 反应温度： | 37℃ | 读数时间 | 1min | R2 | 75μl |
5.计算： 糖化果糖胺含量（mmol/L） = [（A标本-A空白）/ （A校准-A空白）] × 校准值 【性能指标】 1、 空白吸光度 ≤ 0.100； 2、 线性范围0-6.0mmol/L； 3、 批内/分析内精密度 CV≤5％；批间相对极差 ≤7％； 4、 准确性 相对偏差不超过±10％。 5、 抗干扰性 血清胆红素<720umol/L、TG<12mmol/L、血红蛋白<1.5g/L时，对测定无显著影响。 6、方法对照 本试剂盒检测方法与Johnson RN等文献法进行相关性比较试验，结果如下：Y=0.9908X+0.0423，r=0.9934，n=30，Y为本法试剂，X为文献法。 【注意事项】 1、试剂变混浊或空白吸光度值＞0.100时，将不能使用，应弃去； 2、建议各实验室建立自己的正常值范围； 3、试剂与样本量可根据需要按比例调节； 4、请勿用嘴直接吸取试剂，避免接触皮肤、眼睛及粘膜，一旦接触，应即用水冲洗污染部位； 5、使用配套的校准品校准，校准周期为30天，更换试剂批号时需要重新校准。建议使用正常值和病理值生化质控血清进行室内质控，测定的控制值应在确定的限制范围内，若控制值失控，实验室应采取适当的纠正措施。 6、当标本浓度超过检测范围时，应用生理盐水稀释标本后再进行检测，标本值为测定值乘以稀释倍数。 【参考范围】 正常人血清 1.15-2.15mmol/L 建议各实验室制定自己的参考范围。 【储存条件与有效期】 未开封的试剂在2-8℃避光条件下可稳定14个月，置37℃水浴至少可稳定7天。 试剂开封后，存放在分析仪试剂仓中(2-8℃)的试剂在30天内性质稳定。 【参考文献】 1、Negoro H, etal, Amer J Med 1988, 85:360 2、Rosenthal M. A. etal, Clin chem, 1988, 34:360
|
