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【特别推荐】:游离脂肪酸(NEFA)测定试剂使用说明、性能指标  
发布者:idrfz.chen   
 

(本试剂仅用于科研、实验、技术支持,不直接应用于临床诊断)

【简介】

用于全自动生化分析仪测定人体血清游离脂肪酸含量。

游离脂肪酸升高可见于一些病理状态如胰岛素抵抗/2型糖尿病、肥胖、恶性疾病和代谢综合征,并会引发心血管疾病。

【测定方法】

酶法

【测定原理】

游离脂肪酸和辅酶A在乙酰辅酶A合成酶(ACS)的作用下反应生成乙酰辅酶A,乙酰辅酶A在乙酰辅酶A氧化酶的作用下成生HB2BOB2B,随后通过Trinder底物在过氧化物酶(POD)的作用下生成有色产物,与标准比较后定量。

【试剂盒组成】

 

    

    

    

试剂

液体双试剂

试剂Ⅰ:试剂Ⅱ=41

4-氨基安替比林、酚衍生物、乙酰辅酶A合成酶、乙酰辅酶A氧化酶、辅酶A

适量

校准品

液体1ml

游离脂肪酸等

见标签

【样本要求】

标本应空腹抽取,尽快分离血清测定。标本如不能及时测定,应于-20保存,避免反复冻融。肝素治疗患者的血浆样本不适合做分析。

【测定步骤】

1.本试剂为液体双试剂,可直接使用。

2.测定参数:波长:546nm;光径:10mm;温度:37

3.测定方法:

加入物

空白管

标准管

测定管

试剂Ⅰ

200

200

200

蒸馏水(uL)

4

-

-

标准液(uL)

-

4

-

样本(uL)

-

-

4

混匀,置37孵育5分钟,读取各管吸光度A1

试剂Ⅱ(uL)

50

50

50

混匀,置37保温5分钟,读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1

4.上机参数:

  

37

血清+R1反应时间

300

样本量

4uL

  

546nm

试剂Ⅰ

200uL

  

660nm

试剂Ⅱ

50uL

血清+R1+R2反应时间

300

5.计算:

NEFA含量 mmol/L =  [(ΔA标本-ΔA空白)(ΔA标准-ΔA空白)]  × 校准品值

【性能指标】

1 空白吸光度  0.300

2 线性范围 0-3.0mmol/L

3 批内/分析内精密度  CV6%;批间相对极差 8%;

4 准确性  相对偏差不超过±10%。

5 抗干扰性  血清胆红素<60mg/dLTG<11.0mmol/L、血红蛋白<2.0g/L、抗坏血酸<30mg/dL时,对测定无显著影响。

6 方法对照  用本测定试剂和某进口试剂测定120例血清NEFA含量,结果显示相关系数r = 0.991

【注意事项】

1、试剂变混浊或空白吸光度值>0.300时,将不能使用,应弃去;

2、建议各实验室建立自己的正常值范围;

3、试剂与样本量可根据需要按比例调节;

4、请勿用嘴直接吸取试剂,避免接触皮肤、眼睛及粘膜,一旦接触,应即用水冲洗污染部位;

5、使用配套的校准品校准,校准周期为15天,更换试剂批号时需要重新校准。建议使用正常值和病理值生化质控血清进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施。

【参考范围

女性:0.10~0.45 mmol/L     男性:0.10~0.60mmol/L

建议各实验室建立自己的正常参考值范围。

【储存条件与有效期】

未开封的试剂在2-8℃避光条件下可稳定14个月,置37℃水浴至少可稳定7天。

试剂开封后,存放在分析仪试剂仓中(2-8)的试剂在30天内性质稳定。

【参考文献】

1Ford RP.  Clin.Chem. 36 (33) :1073.

2Menéndez LG, Fernández AL, Enguix A. Ann Clin Biochem. 38(Pt 3):252-5

 


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