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【特别推荐】:低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测定试剂使用说明、性能指标  
发布者:idrfz.chen   
 

 (本试剂仅用于科研、实验、技术支持,不直接用于临床诊断)

【简介】

用于全自动生化分析仪测定人体血清低密度脂蛋白胆固醇含量。

动脉粥样硬化(AS)斑块中沉淀的脂质主要是低密度脂蛋白(LDL-C),在各类脂质中,LDL-C被认为是主要的致病因素,而高密度脂蛋白(HDL-C)可能起保护作用,血清总胆固醇(TC)大致反应LDL胆固醇(LDL-C)水平,但也受HDL-C水平的影响,因此在AS脂类危险因素判别中,TC偏高时,测定LDL-C有重要临床意义。

【测定方法】

直接清除法

【测定原理】

第一步,试剂中的多聚体和非离子表面活性剂与LDL结合,选择性地抑制LDL与胆固醇酶试剂反应,而胆固醇氧化酶(C0)和胆固醇酯酶(CE)与非 LDL脂蛋白(HDL,VLDL,CM)中的胆固醇反应,由于缺乏一个色源,Trinder反应不显色。第二步,LDL-C与胆固醇酶试剂反应而显色。

【试剂盒组成】

 

    

    

    

试剂

液体双试剂

试剂Ⅰ:试剂Ⅱ=31

4-氨基安替比林、TOOS、工具酶等

适量

LDL-C校准品

冻干1ml

LDL-C

见标签

【样本要求】

标本应空腹抽取,尽快分离血清,在冷藏(2-8)条件可稳定1周。标本如不能及时测定,应于-20保存,避免反复冻融。

【测定步骤】

1.本试剂为液体双试剂,可直接使用。

2.测定参数:波长:546nm;光径:10mm;温度:37

3.测定方法:

加入物

空白管

标准管

测定管

试剂Ⅰ

300

300

300

蒸馏水(uL)

3

-

-

标准液(uL)

-

3

-

样本(uL)

-

-

3

混匀,置37孵育5分钟,读取各管吸光度A1

试剂Ⅱ(uL)

100

100

100

混匀,置37保温5分钟,读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1

4.上机参数:

  

37

血清+R1反应时间

300

样本量

3uL

  

546nm

试剂Ⅰ

300uL

  

660nm

试剂Ⅱ

100uL

血清+R1+R2反应时间

300

5.计算:

LDL-C含量 mmol/L =  [(ΔA标本-ΔA空白)(ΔA标准-ΔA空白)]  × 校准品值

【性能指标】

1 空白吸光度 0.05

2 线性范围0-12.9mmol/L

3 批内/分析内精密度  CV5%;批间相对极差 7%;

4 准确性  相对偏差不超过±10%。

5 抗干扰性  血清胆红素<250μmol/LTG<18.2mmol/L、血红蛋白<5.0g/L、抗坏血酸<55mg/dL时,对测定无显著影响。

6 方法对照  用本测定试剂和某进口LDL-C测定试剂测定100例血清LDL-C含量,结果显示相关系数>0.980

【注意事项】

1、试剂变混浊或空白吸光度值>0.05时,将不能使用,应弃去;

2、建议各实验室建立自己的正常值范围;

3、试剂与样本量可根据需要按比例调节;

4、请勿用嘴直接吸取试剂,避免接触皮肤、眼睛及粘膜,一旦接触,应即用水冲洗污染部位;

5、使用配套的校准品校准,校准周期为30天,更换试剂批号时需要重新校准。建议使用正常值和病理值生化质控血清进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施。

6、不能将R1R2混成单试剂工作液。

【参考范围

参考值范围:2.07-3.10mmol/L

建议各实验室建立自己的正常参考值范围。

【储存条件与有效期】

未开封的试剂在2-8℃避光条件下可稳定12个月,置37℃水浴至少可稳定7天。

试剂开封后,存放在分析仪试剂仓中(2-8)的试剂在30天内性质稳定。

【参考文献】

1. Rifai N, Bachorik PS, Albers JJ. Lipids, lipoproteins and apolipoproteins. In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W.B Saunders Company; 1999. p. 809-61.

2. Recommendation of the Second Joint Task Force of European and other Societies on Coronary Prevention  Prevention of coronary heart disease in clinical practice. Eur Heart J 1998;19: 1434-503.

3. Bachorik PS. Measurement of low-density lipoprotein cholesterol. In: Rifai N, Warnick GR, Dominiczak MH, eds Handbook of lipoprotein testing. Washington: AACC Press,;1997.p.145-60.

4. Schaefer EJ, McNamara J. Overview of the diagnosis and treatment of lipid disorders. In: Rifai N, Warnick GR, Dominiczak MH, eds. Handbook of lipoprotein testing Washington: AACC Press;1997.p.25-48

 


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